E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycète Phytophthora infestants (Mont) de Bary provoque le mildiou, une maladie dangereuse des pommes de terre et des tomates. L'une des principales sources d'inoculum primaire P. infestans sont des structures reproductrices au repos à parois épaisses - oospores.
Les oospores hybrides formées à la suite du croisement de souches parentales génétiquement différentes contribuent à une augmentation de la diversité génotypique dans la population, ce qui accélère le processus d'adaptation des souches aux nouvelles variétés et aux fongicides appliqués.
Formation d'Oospore P. infestans sur le terrain a été notée dans de nombreux pays du monde: Russie (Smirnov et al., 1999), Norvège (Hermansen et al., 2002), Suède (Strömberg et al., 2001), Pays-Bas (Kessel et al., 2002) et autres Régions. Les oospores sont capables de survivre pendant plus de 2 ans dans le sol dans un état viable (Bødker et al., 2006) et provoquent une infection des plantes après avoir hiverné (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Auparavant, il a été montré que les feuilles des plantes de différents niveaux de la pomme de terre présentent des différences de résistance au mildiou; il augmente des feuilles inférieures aux feuilles supérieures. Cette tendance ne dépend pas de l'âge des feuilles, de l'âge de la plante ou de la variété de pomme de terre (Vesper et al., 2003). Dans le même temps, nous n'avons pas pu trouver de données sur les différences d'intensité de formation d'oospores dans les feuilles de différentes couches de la pomme de terre dans la littérature. Cependant, si de telles différences existent, elles doivent être prises en compte lors du prélèvement d'échantillons de feuilles pour l'analyse de la formation des oospores et lors de l'interprétation des résultats obtenus par d'autres auteurs. Le but de ce travail était d'étudier la formation d'oospores dans les feuilles détachées de différentes couches d'un plant de pomme de terre, placées dans les mêmes conditions dans des chambres humides.
matériaux et méthodes
Nous avons utilisé 5 isolats P. infestans différents types d'accouplement isolés d'échantillons affectés provenant des régions de Moscou, Ryazan et Leningrad. Parmi celles-ci, 3 paires de souches de différents types d'accouplement ont été sélectionnées, donnant des oospores abondantes lorsqu'elles ont été testées dans du milieu gélosé d'avoine.
Pour les tests, nous avons utilisé des plants de pommes de terre exempts de virus des variétés suivantes cultivées en serre (dans un substrat de tourbe): début Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, mi-début Ilyinsky, mi-saison Yanka.
Des feuilles simples de différents niveaux du plant de pomme de terre ont été sélectionnées pour l'analyse. Trois feuilles ont été sélectionnées à partir du niveau inférieur (4 feuilles composées inférieures), trois du haut (3-4 feuilles composées sur le dessus) et trois feuilles du centre du buisson. Des feuilles simples ont été pesées, photographiées sur du papier coordonné (pour calculer le volume et la surface), puis placées à l'envers sur la surface de l'eau stérile, versées 25 ml dans des boîtes de Pétri. Ensuite, chaque feuille a été infectée avec une goutte d'une suspension mixte d'isolats de zoosporanges A1 et A2 du type d'accouplement. Pour trois feuilles collectées à chaque niveau, un inoculum de trois paires différentes d'isolats a été utilisé. Une feuille a été infectée avec un mélange d'inoculum d'une paire d'isolats.
Pour préparer une suspension de zoosporanges, des isolats de différents types d'accouplement ont été cultivés sur du milieu gélosé d'avoine pendant 7 jours, après quoi les zoosporanges ont été lavés avec de l'eau distillée stérile. La concentration de l'inoculum était de 5 à 7 zoospores dans le champ de vision du microscope à un grossissement de 80x. Chaque feuille a été infectée par une goutte d'une suspension mixte d'isolats de zoosporanges A1 et A2 de type accouplement.
Dans toutes les expériences, 3 feuilles de pomme de terre ont été utilisées par variante. Après incubation pendant 20 jours à 18 ° C, chaque feuille a été homogénéisée dans un mortier avec 2 ml d'eau distillée. A partir de la suspension résultante, 3 échantillons ont été prélevés, à partir desquels des préparations pour la microscopie ont été préparées.
Dans chaque variante, 180 champs de vision ont été examinés, après quoi le nombre d'oospores a été recalculé par 1 mm2 surface de la feuille. Les résultats de comptage pour chaque variante ont été moyennés.
Pour calculer l'intervalle de confiance (μ) pour un niveau de signification de 0,05, la formule suivante a été utilisée
où s est l'écart type, n est le nombre de mesures, t est la constante du test t pour un niveau de signification de 0,05. Tous les calculs ont été effectués dans Excel (package Microsoft Office).
résultats et discussion
L'inoculation de feuilles prélevées sur différentes couches de la pomme de terre et placées dans les mêmes conditions dans des chambres humides a révélé des différences dans l'intensité de la formation des oospores. Dans toutes les variétés étudiées, le nombre maximum d'oospores s'est formé lors de l'inoculation des feuilles récoltées dans les niveaux inférieur et intermédiaire de la brousse. Aucune différence significative n'a été trouvée dans la formation des oospores dans les feuilles inférieures et moyennes.
Le nombre minimum d'oospores s'est formé dans les feuilles de la couche supérieure (Fig. 1).
Dans les feuilles des niveaux inférieur et intermédiaire, le nombre maximum d'oospores a été formé dans les variétés Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar et Osiris. Ils se sont formés un peu moins intensément dans les feuilles de la variété Yanka. Le nombre maximum d'oospores dans les feuilles de la couche supérieure a été observé dans les feuilles de la variété Uladar, puis Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin sont allées dans un ordre décroissant, mais toutes les différences n'étaient pas statistiquement significatives.
Figure: 1. Formation d'oospores dans les feuilles de différentes couches de la pomme de terre. Les inférieurs sont les feuilles des trois niveaux inférieurs du buisson, les supérieurs sont 3-4 feuilles complexes du haut de la plante, les du milieu sont du milieu du buisson.
Les barres d'erreur indiquent l'intervalle de confiance pour un niveau de signification de 0,05.
Sur le terrain, les conditions microclimatiques contribuent également à la formation d'oospores dans les feuilles inférieures et moyennes du buisson: humidité plus élevée, insolation solaire réduite et fluctuations quotidiennes de la température (Harrison, 1992). La pulvérisation par le haut entraîne moins de pesticides au bas et au centre de la brousse. Pour réduire la formation d'oospores, il faut utiliser des technologies qui permettent de livrer avec succès des fongicides aux parties inférieure et médiane de la brousse. De bons résultats peuvent être obtenus en utilisant des pulvérisateurs à air turbulent et des fongicides systémiques qui peuvent se propager aux parties non traitées de la brousse.
Ce travail a été soutenu par la Russian Science Foundation (projet n ° 14-50-00029).
L'article a été publié dans la revue "Potato Protection" (n ° 2, 2015)